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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
试剂配制区(Ⅰ区):洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管。
DNA模板添加区(Ⅱ区):压力比Ⅰ区低,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持负压,使得内部空气不外泄,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。操作时压力遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。
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规划PCR实验室需要知道些什么?
PCR实验室尽量有分类存储实验样品、实验器材和实验试剂的地方,并且还要提供足够的实验工作台,以便于能够提供给实验人员或者实验组可以分别进行实验的空间和耗材。还有实验区消毒物品的摆放也需要到位,方便完成实验后可以有效地进行整理和清洁实验器皿。
PCR实验室除了要认真规划之外,还要进行严格管理把关,才能成为一个合格的实验室。
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PCR实验室设计建设标准规范
各区域的功能与设备
试剂制备区主要为扩增试剂的准备,分装盒保存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、紫外灯。
样品制备区主要是样品的混样和测试样品的制备。其主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水槽、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。操作台是否使用生物安全柜、净化工作台,或工作台,要根据样品的性质和制备要求来决定,如疾控中心、临床医学实验室一般选择生物安全柜,植物、检疫等选择柜。
扩散区为pcr扩增反应系统的制备和模板的添加、核酸扩增。在生物安全柜(超净台)内进行加样,超净台气流方向宜选用垂直式。冰箱,生物安全柜,离心加样装置,废物容器,紫外灯等。
扩增产物分析区为扩增产物的分析区域。如果只使用全自动扩增检测仪,可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。本区域所使用的仪器设备有、、加样器和水浴箱等。
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