拉曼光谱仪知识
拉曼(Sir Chandrasekhara Venkata Raman, 1888(戊子年)-1970)。印度物理学家,又译喇曼。因光散射方面的研究工作和拉曼效应的发现,获得了1930年度的诺贝尔物理学奖。1921 年,印度物理学家拉曼(C. V. Raman)从英国搭船回国,在途中他思考着为什么海洋会是蓝色的问题,而开始了这方面的研究,促成他于 1928 年 2 月发现了新的散射效应,就是现在所知的拉曼效应,在物理和化学方面都很重要。
拉曼光谱在生物医学中的应用
拉曼光谱图中含有丰富的分子指纹信息,可以通过拉曼峰频移的位置分析物质的生化组成特性。通过对比正常与病变组织的拉曼光谱信息,在如实反映组织生化组成的基础上,不但可以用于探讨疾病发生与机制,而且更易实现临床重大疾病的早期量化诊断。选择合适波长的激光用于生物组织光谱激发,对于临床光谱分析测量尤其重要。紫外光照射会引起组织光化学损伤,可见光照射会激发强烈的组织自体荧光,因此,临床拉曼光谱分析装置常使用近红外光作为激发光。相比于紫外光与可见光,近红外光具有更的组织穿透性,从而可实现更大区域内组织光谱的激发。而且,低功率近红外光能产生较少的组织光化学损伤与自体荧光。拉曼光谱关于分子结构方面的识别应用
科学工作者利用光谱仪还可以做更加细致的工作,进一步区别分子的结构。
例如在有机化学方面,对不同的化学基团做拉曼光谱分析,可以确定‘在什么频率范围内’出现‘吸收谱的峰值’就表示测试的样品中‘含有特定的化学键或功能基团’。科学工作者已经做了大量的基础分析工作,这为‘化学结构的描述和判断’、‘高分子化学组份和结构’、‘高分子材料的相容性’、‘各类蛋白质的结构’、‘成份分析’和‘结构重组’等方面带来方便。
拉曼光谱仪的优点
拉曼光谱的分析方法一般不需要对样品进行前处理,也没有样品的制备过程,避免了一些误差的产生,样品可直接通过光纤探头或者透过玻璃、石英和光纤测量。可提供快速、简单、可重复且的是无损伤的定性定量分析,灵敏度高。此外拉曼光谱用于分析有下列各项优点。
①由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光谱是研究水溶液中的生物样品和化学化合物的理想工具。
②拉曼光谱一般一次可以同时覆盖50~9000cm-1的区间,可对有机物和无机物进行分析。相反,若让红外光谱覆盖相同的区间则必须改变光栅、光束分离器、滤波器和检测器。
③拉曼光谱谱峰清晰尖锐,更适合数据库搜索,以及运用差异分析进行定性研究和定量研究。在化学结构分析中,独立的拉曼区间的强度可以和功能团的数量相关。
④因为激光束的直径在它的聚焦部位通常只有微米量级,常规拉曼光谱只需要少量的样品就可以得到,这是拉曼光谱相对常规红外光谱一个很大的优势。而且,拉曼显微镜物镜可将激光束进一步聚焦限1~2μm以分析更小面积的样品。
⑤共振拉曼效应可以用来有选择性地增强生物大分子发色团的振动,这些发色基团的拉曼光强能被选择性地增强103~104倍。
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